A型肉毒**對膝骨性關節(jié)炎大鼠模型鎮(zhèn)痛效果及機制的實驗研究(下)
3 討論
KOA 是一種以關節(jié)軟骨的變性、破壞、滑膜增生及骨質增生為特征的慢性全關節(jié)退行性**[1]。本病多在中年后發(fā)病,是引起中老年人關節(jié)疼痛的*常見的原因。臨床主要表現(xiàn)為關節(jié)疼痛、腫脹、僵硬,且導致不同程度的活動受限,甚至嚴重影響日常生活。膝骨性關節(jié)炎臨床**方法很多,口服止痛劑不能很好的達到緩解疼痛的目的,而且有**反應和其他**相互作用限制了其應用;關節(jié)腔內注射糖皮質**和透明質酸可以緩解疼痛,能在短期內改善癥狀,但其療效及持續(xù)時間尚不穩(wěn)定;關節(jié)鏡清創(chuàng)術后有出現(xiàn)關節(jié)腔內再次粘連及繼發(fā)滑膜炎的可能;關節(jié)置換有很高的手術風險[3]。因此急需**慢性關節(jié)炎的**、有效的方法。
BTX-A 的藥理機制是與神經肌肉接頭處突觸前膜的膽堿能神經末梢快速結合后,通過裂解相關蛋白[5],抑制乙酰膽堿的釋放,阻斷神經肌肉間的傳導,減少肌肉的痙攣和收縮,因此早期廣泛用于**肌肉過度活動性**,以及用于美容除皺等外科領域[6]。近年,將BTX-A 應用于偏**、帶狀皰疹后神**[7]、糖尿病周圍神經病變[8]、腰背痛等臨床研究中,均有明顯的**效果。研究表明,BTX-A 不僅可以使肌肉松弛,還能緩解由肌痙攣引起的疼痛,而且BTX-A 的鎮(zhèn)痛機制并不依賴對肌肉的松弛作用, 當肌張力恢復正常后,它的鎮(zhèn)痛作用仍然很明顯[9],可見BTX-A 對由肌痙攣或非肌痙攣引起的疼痛均有效果。表明肉毒**的鎮(zhèn)痛作用尚存在其他的機制。Weigand H[10—11]等在貓模型中用125I 標記的肉毒**行肌肉注射,注射后48h 鎮(zhèn)痛效果出現(xiàn),且同時在貓背根神經節(jié)及脊髓中發(fā)現(xiàn)了標記的肉毒**。說明肉毒**的作用與背根神經節(jié)和脊髓密切相關,而背根神經節(jié)是疼痛信號傳導的**級神經元, 鈉離子通道Nav l.8 特異性表達在脊神經節(jié),在炎癥性和神經病理性疼痛形成中起到有重要作用[12]。本研究擬通過觀察BTX-A 是否能對骨性關節(jié)炎疼痛模型動物產生鎮(zhèn)痛作用,并進一步探究BTX-A 對疼痛行為學、熱痛閾、背根脊神經神經元中Nav1.8 蛋白表達的影響,以便了解BTX-A 在實驗研究中**疼痛的效果和作用機制。
在大鼠右膝關節(jié)腔內注射4%木瓜蛋白酶溶液后,其導致的炎癥改變一般發(fā)生于5 天左右,主要表現(xiàn)為關節(jié)腫痛及活動受限,行走拖后腿等不協(xié)調步態(tài)。模型成功后節(jié)腔內注射BTX- A 及注射用水(WFI),從自發(fā)疼痛步態(tài)分析可見,與WFI 組相比, BTX-A 組的大鼠自發(fā)疼痛行為改善明顯,隨著注射后時間延長(≤5 天),自發(fā)疼痛步態(tài)改善越明顯。從熱痛閾測定結果可分析到,模型組大鼠第1 天給予BTX-A 注射后24h 大鼠的熱痛閾值即明顯上升,且隨時間的延長其緩解疼痛效果逐漸明顯,一直可持續(xù)到注射后第 5 天且BTX- A 組熱痛閾明顯高于WFI 組。說明BTX-A 的確對關節(jié)炎有鎮(zhèn)痛作用。
研究顯示注射BTX-A1 天后即可緩解疼痛,表明其鎮(zhèn)痛作用機制可能存在更多解釋。研究顯示當外周收到傷害感受后,初級感覺傳入神經元可產生異常的自發(fā)電活動,這種異位沖動的產生可能在病理性疼痛形成中起至關重要的作用[13—14],而Matak 等[15]研究發(fā)現(xiàn)外周足部應用少量的BTX-A 后,可經坐骨神經傳導至脊髓,因此推測BTX-A 可能通過影響感覺傳入的異常興奮而產生鎮(zhèn)痛作用。DRG 神經元是感覺信號傳導的**級神經元,在痛覺感知和傳導過程中起著重要的作用。電壓門控鈉離子通道Nav1.8 和 Nav1.9 特異性表達在脊神經節(jié),其中Nav1.8 主要介導產生動作電位上升支的80%的內向電流,激活其動作電位使痛覺上傳[16]。在本實驗中, 通過**組織化學法檢測到BTX-A 干預后脊神經節(jié)Navl.8 蛋白表達量下降。因此推測,BTX-A 可能通過影響 Nav1.8 蛋白的表達,減少神經遞質的釋放,減少外周敏化,間接地減少**致敏從而起到鎮(zhèn)痛作用。本實驗為BTX-A 在關節(jié)炎的疼痛**提供了實驗依據。
4 結論
①在右膝骨性關節(jié)炎模型中,予關節(jié)腔注射BTX-A,可改善其自發(fā)疼痛步態(tài),在不同時間點(術后1 天、3 天、5 天)均有類似的鎮(zhèn)痛效果,且隨著注射后時間延長(≤5 天),自發(fā)疼痛步態(tài)改善愈明顯。② 給予BTX-A 注射后,模型組大鼠24h 后熱痛閾值即明顯上升,且隨時間的延長其緩解疼痛效果逐漸明顯,說明BTX-A 可緩解疼痛,提高熱痛閾值。③在大鼠骨性關節(jié)炎模型中,通過關節(jié)腔內注射 BTX- A,可見脊神經節(jié)中鈉離子通道Nav 1.8 表達下降,可能通過抑制DRG 神經元中原本表達上調的Nav1.8 蛋白,減少**致敏,減輕關節(jié)疼痛,提高痛閾,從而起到鎮(zhèn)痛作用。